Laporan Praktikum Kimia Analisis Instrument Autoclaf

A. Judul Percobaan
Autoclave

B. Tujuan Percobaan
1. Mengetahui prinsip kerja autoclave
2. Memahami cara penggunaan autoclave
3. Mengetahui fungsi penggunaan autoclave


C. Pembahasan

         Sterilisasi adalah suatu proses untuk membunuh semua jasad renik yang ada, jika ditumbuhkan di alam suatu medium tidak ada jasad renik yang dapat berkembang biak. Sterilisasi harus dapat membunuh renik yang paling tahan panas yaitu spora bakteri (Ferdiaz, 1992). Adanya pertumbuhan mikroorganisme menunjukkan bahwa pertumbuhan bakteri masih berlangsung dan tidak sempurnanya proses sterilisasi. Jika sterilisasi berlangsung sempurna, maka spora bakteri yang merupakan bentuk paling resisten dari kehidupan mikrobia akan diluluhkan (Lay dan Hatowo, 1994).

Menurut Barker ( 1998 ), jenis metode sterilisasi adalah :
1. Sterilisasi Panas/thermal
Sterilisasi panas merupakan sterilisasi yang dianggap paling efektif, tetapi kelemahannya tidak bisa diaplikasikan pada zat aktif yang tidak tahan panas/rusak karna panas, sterilisasi panas dibagi menjadi dua :
a. Sterilisasi Panas Lembab
Sterilisasi panas lembab adalah sterilisasi dengan menggunakan uap panas dibawah tekanan berlangsung di dalam autoklaf, umumnya dilakukan dalam uap jenuh dalam waktu 30 menit dengan suhu 115 C - 116 C, lama dan suhu tergantung bahan yang di sterilisasi, untuk mengetahui nya lihat farmakope indonesia.
b. Sterilisasi Panas Kering
Metode sterilisasi dengan menggunakan oven pada suhu 160-170 C selama 1-2 jam. umumnya sterilisasi panas dilakukan pada jenis minyak, serbuk yang tidak stabil terhadap uap air, dan alat-alat gelas ukur yang tidak digunakan untuk pengukuran (Bukan alat ukur).

2. Sterilisasi Radiasi
Sterilisasi radiasi dibagi menjadi dua :
a. Radiasi elektromagnetik (EM) adalah sterilisasi menggunakan sinar ultraviolet (UV). sinar UV ini memotong DNA mikroorganisme sehingga ekspresi DNA tidak terjadi. keterbatasannya sterilisasi cara ini hanya bisa bekerja pada permukaan, tidak bisa menembus bahan padat.
b. Radiasi pengion adalah metode sterilisasi yang menggunakan sinar gamma untuk merusak DNA mikroorganisme, kelebihannya bisa menembus zat padat.
3. Sterilisasi Gas
Sterilisasi menggunakan gas etilen oksida, kelemahannya zat ini mudah terbakar, bersifat mutagenik dan toksik, sehingga dikhawatirkan terdapat residu setelah sterilisasi. Pilihan sterilisasi cara gas biasanya pilihan akhir bila zat tidak tahan panas ataupun uap air
4. Sterilisasi Filtrasi
Sterilisasi yang menggunakan alat khusus yang menggunakan penyaring/filter matriks pori pori tertentu. menggunakan pori pori 10 nm untuk virus dan 0,22 nm untuk bakteri.
Menurut Esmiyati, dkk (2012), autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk sterilisasi suatu benda menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi. Menurut Volk dan Wheeler (1993), autoklaf adalah alat yang digunakan untuk mensterilkan alat dan bahan dengan dilengkapi pengaturan suhu dan waktu. Agen sterilisasi yang efisien dalam penggunaan autoklaf yaitu uap di bawah tekanan dan agen tersebut merupakan cara utama yang digunakan untuk mensterilkan pembalut peralatan, media, dan barang – barang yang akan terkontaminasi untuk pembedahan.
Autoclave Hirayama HVE 50 merupakan alat yang digunakan untuk sterilisasi alat/bahan dengan menggunakan temperature dan/atau uap tekanan tinggi. Termasuk alat gelas, keramik, logam atau karet, air, media, reagen dan obat-obatan cair ( Saputra, 2014 ).
Fungsi Autoclave di gunakan untuk mensterilkan suatu benda atau suatu media.Autoclave memiliki kemampuan memanaskan suatu benda hingga mencapai suhu 121°c sehingga dengan pencapaian suhu tersebut memungkinkan untuk membunuh endospora yaitu sel resisten yang di produksi oleh bakteri,selini tahan terhadap pemanasan,kekeringan dan antibiotik.
Waktu sterilisasi dengan menggunakan autoclavepun sangat bergantung dengan benda atau media yang akan di sterilisasi.Apabila objek yang di sterilisasi sangat tebal dan banyak maka akan memperlambat penyerapan suhu panas ke objek yang di sterilisasi tersebut.Untuk penambahan waktu sendiri berkisar antara 10-15 menit ( Herastuti dkk, 2007 ).
Prinsip kerja autoclave yaitu menggunakan uap air panas dan tekanan tinggi selama proses sterilisasi. Bagian autoclave terdiri dari timer untuk mengatur waktu, katup pengeluaran uap panas, indicator tekanan, tutup pengaman, thermometer, dan batas penambahan air ( Saputra, 2014 ).
Menurut Stefanus ( 2006 ), prinsip kerja autoclave adalah memanfaatkan suhu diatas 121oC dan tekanan uao 1 atm. Tekanan yang digunakan pada umumnya 15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121oC ( 250oF ). Jadi tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi-inchi ( 15 Psi = 15 pounds per square inch ). Waktu yang dibutuhkan autoklaf sekitar 3-5 jam. Lama sterilisasinya adalah 15 menit untuk suhu 121oC.
Keunggulan autoclave adalah dapat mensterilkan alat dan bahan hingga tidak ada organisme lagi. Autoclave juga memerlukan waktu yang singkat untuk mensterilisasi alat dan bahan. Autoclave menggunakan suhu dan tekanan tinggi sehingga dapat membunuh mikroorganisme disbanding dengan udara panas biasa. Autoklaf memiliki kelebihan yaitu alat perebus yang bertekanan tinggi ( Permatasari dkk, 2013 ).
Kekurangan autoclave adalah harus menggunakan air mendidih karena uapnya memenuhi kompartemen autoclave dan terdesak keluar dari klep pengaman. Autoclave membutuhkan suber panas yang terus menerus. Autoclave membutuhkan peralatan yang butuh perawatan terus menerus ( Ferdias, 1992 ).
Persiapkan alat (pipet ukur,Cawan petridis) yang akan di sterilisasi menggunakan autoklaf. Alat-alat tersebut dibungkus menggunakan kertas payung (yang halus diluar).Cawan petridis di letakkan secara terbalik. Hal ini bertujuan agar air tidak dapat masuk ke dalam cawan petridis. Lalu bungkus alat-alat dengan kertas payung lalu dibungkus menggunakan karet, hal ini bertujuan agar bungkusan kertas payung tidak terbuka supaya mencegah air masuk ke dalam alat-alat tersebut.
Autoklaf di nyalakan, saklar utama autoclaf terletak di sisi kanan bawah. Tombol saklar itu berfungsi untuk menyalakan / mematikan autoklaf secara keseluruhan. Klik tombol power on/off pada layar display untuk memulai pengaturan sebelum memulai proses sterilisasi. Sebelum alat-alat dimasukkan cek botol penguapan (Exhaust bottle) harus sesuai tanda batas yang sudah ditentukan. Hal ini bertujuan untuk mencegah alat (autoklaf) rusak. Karena botol penguapan akan sangat berfungsi pada proses sterilisasi untuk menampung air sisa penguapan bahkan saat alat membutuhkan air, autoklaf bisa mengambil dari botol penguapan. Maka dari itu air harus sesuai dengan tanda batas.
Setelah itu tambahkan aquades secara perlahan melewati dinding karena ada detector pada autoklaf. Penggunaan aquades untuk mengisi bagian dalam autoklaf karena mengacu pada tujuan sterilisasi yaitu untuk menghiindari kontaminasi dengan senyawa yang tidak diinginkan. Akuades memiliki kandungan senyawa yang lebih sedikit dibandingkan dengan air biasa. Akuades akan diatur hingga suhunya menjadi 121°C dan dengan tekanan di atas tekanan atmosfer yang digunakan untuk penguapan pada autoklaf yang dapat membunuh organisme yang ada pada alat dan bahan.
Masukkan keranjang ke dalam autoclaf. Keranjang pertama di kosongkan, keranjang kedua di isi dengan alat-alat yang telah dibungkus oleh kertas payung. Kemudian autoklaf ditutup. Ganti mode menjadi mode 2 (mode yang dipilih untuk mensterilkan alat dan bahan). Lalu klik set, setelah itu klik tanda ↑ dan tanda ↓ untuk mengatur suhu. Cek katup penguapan tertutup agar tekanan tetap 1atm. Lalu klik start untuk memulai sterilisasi.
Autoklaf harus digunakan secara baik dan benar, untuk menghasilkan alat dan bahan yang telah bebas dari kontaminasi atau pengaruh negatif akibat mikrobia-mikrobia yang tidak diperlukan, sehingga proses sterilisasi dapat berjalan dengan baik. Penggunaan autoklaf yang benar adalah :
1. Benda yang diletakkan di dalam autoklaf harus telah mengalami proses sanitasi, pencucian dan pengeringan.
2. Benda dibungkus dan dipisahkan untuk memastikan dapat terpapar panas yang merata pada semua bagian permukaan.
3. Semua bahan yang digunakan untuk membungkus haruslah sesuai untuk penggunaan dalam autoklaf.
4. Waktu dijalankan ketika tekanan mencapai 1 atm dan suhu mencapai 121°C.
Setelah proses sterilisasi selesai tunggu hingga suhu turun ± 97-98º C baru autoklaf dapat dibuka. Ketika proses telah selesai, penutup autoklaf harus segera dibuka sedikit agar semua uap air keluar dan benda yang telah disterilkan (artikel steril, sterile article) yang panas dan lembab sebaiknya dibiarkan di dalam autoklaf hingga dingin dan kering.
Mikroorganisme dapat mengkontaminasi artikel steril pembungkus yang lembab apabila penutup dibuka terlalu lebar atau artikel dipegang saat lembab. Tunggu suhu ± 50º C agar mesin bisa dimatikan.
Alat dan bahan yang digunakan pada praktikum pengoperasian autoklaf meliputi berbagai alat alat untuk wadah bahan yaitu pipet ukur, cawan petri. Sedangkan untuk bahan yang digunakan meliputi karet gelang untuk mengikat kertas payung yang digunakan sebagai pembungkus pada erlenmeyer dan kertas payung.
Kertas payung yang digunakan pada praktikum autoklaf berfungsi sebagai pembungkus untuk alat yang akan disterilisasi dengan autoklaf. Cara pembungkusan kertas payung yang benar yaitu bagian kertas payung yang halus berada diluar sedangkan bagian yang kasar berada di dalam, hal ini karena permukaan kertas payung yang halus memiliki kemampuan untuk tidak menyerap air sehingga alat yang akan disterilsasi tidak basah atau terkontaminasi dengan air. Pada sterilisasi alat cawan petri dilakukan dengan cara membalik posisi dari alat tersebut. Hal ini dilakukan karena cawan petri yang mengandung bahan atau medium didalamnya tidak terkena atau terkontaminasi oleh air yang ada pada autoklaf.
Pembahasan alat-alat atau tombol dalam autoklaf :
1. Panel operasi (Operation Switch) :
b. power on/off : untuk menyalakan atau mematikan autoklaf dari proses sterilisasi.
c.  ↑ (tanda panah ke atas) ↓ (tanda panah ke bawah) : untuk mengatur (menaikkan – menurunkan) suhu.
d. Set : untuk mengatur waktu dan suhu.
e. Next : untuk ganti mode.
f. start/stop : untuk memulai atau menghentikan proses sterilisasi.
2. Panel layar (Display) : menunjukkan suhu, waktu, proses sterilisasi dan mode yang akan dipilih.
3. Gagang penutup (Lid Handle) : untuk dipegang (pegangan) saat akan menutup atau membuka autoklaf.
4. Lid open/close : Menutup autoklaf (terdapat di bagian dalam).
5. Katup penguapan (Fine exhaust knob) : untuk menurunkan suhu
6. Layar tekanan (Preasure Gauge) : Untuk menunjukkan berapa tekanan yang digunakan.
7. Exhaust bottle : untuk menampung air selama proses sterilisasi. Isi air di exhaust bottle harus sesuai tanda batas.
8. Kaki atau penyangga autoklaf (Caster) : Tempat bertumpuhnya autoclave
9. Lid : Lock/unlock : untuk mengunci atau membuka kunci autoklaf.
10. Keranjang (Chamber) : Tempat untuk memasukkan alat/bahan yang disterilkan.
11. Ventilasi (Vent hole) : Untuk tempat keluarnya udara
12. panel utama on/off : untuk menyalakan atau mematikan autoklaf secara keseluruhan.

KESIMPULAN 
Berdasarkan percobaan yang telah dilakukan, dapat di peroleh beberapa simpulan yaitu sebagai berikut:
1. Prinsip kerja autoklaf adalah sterilisasi panas basah dengan penggunaan uap air jenuh pada tekanan diatas tekanan atmosfer dan digunakan untuk memanaskan isi autoklaf.
2. Cara penggunaan autoklaf yaitu nyalakan tombol on/off dan buka  autoklaf. Cek exhauge bottle untuk memastikan air harus ditanda batas sehingga tidak terjadi peluapan karena kelebihan air dan mesin tidak akan rusak. Masukkan aquades secara perlahan pada autoklaf dengan cara melewati dinding-dindingnya untuk menghindari kerusakan pada autoklaf. Masukkan alat dan bahan yang akan disterilisasi yang telah dibungkus dengan kertas payung yang telah diletakkan di dalam keranjang kemudian ditutup. pastikan autoklaf telah terkunci dan periksa katup buangan agar tidak ada udara yang keluar.  Pilih mode pada autoklaf. Atur suhu dan tekanan pada autoklaf kemudian klik start. Tunggu hingga proses sterilisasi selesai dan suhu pada autoklaf turun menjadi 97°C. Keluarkan alat dan bahan dari autoklaf, tunggu hingga suhu autoklaf menjadi 50°C dan matikan autoklaf.
3. Fungsi Autoclave di gunakan untuk mensterilkan suatu benda atau suatu media.Autoclave memiliki kemampuan memanaskan suatu benda hingga mencapai suhu 121°c sehingga dengan pencapaian suhu tersebut memungkinkan untuk membunuh endospora yaitu sel resisten yang di produksi oleh bakteri,selini tahan terhadap pemanasan,kekeringan dan antibiotik.Waktu sterilisasi dengan menggunakan autoclavepun sangat bergantung dengan benda atau media yang akan di sterilisasi.

DAFTAR PUSTAKA 

Barker, K. 1998. At The Bench, A Laboratory Navigator. Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York.
Esmiyati., 2012. Pembudidayaan Bandeng Juwana Berbasis Kearifan Lokal
Ferdias, S., 1992, Mikrobiologi Pangan, Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Herastuti, S., Wiworo, H., Hidayati, S., dan Bakri, M. H. 2007. Panci Tekan Sebagai Alat sterilisasi Alternatif Pengganti Autoclave. Jurnal Teknologi Kesehatan (3) : 2-4.
Lay, B., 1994, Analisis Mikroba di Laboratorium, Raja Grafindo Persada, Jakarta.
Permatasari, T., Sumarlan, S., dan Susilo. 2013. Uji Pembuatan Marning Jagung Dengan Menggunakan Autoclave. Jurnal Keteknian Pertanian Tropis dan Biosistem 1 (1): 69-75.
Saputra, W. 2014. Budi Daya Jamur Merang. Agromedia pustaka, Jakarta.
sebagai Muatan Lokal untuk Menumbuhkan Sikap Konservasi Siswa. Jurnal Sains Universitas Negeri Semarang. 1(1) : Hal 21 – 25.
Stefanus, L. 2006. Formulasi Steril. Andi, Indonesia.
Volk,W.A. dan Wheeler, M.F. 1993. Mikrobiologi Dasar. Erlangga, Jakarta.

Komentar

Postingan Populer